Izbor medijev za biofiltre za velikega brancina- Značilnosti biofilma in uspešnost rasti
Veliki usti brancin (Microopterus salmoides), znan tudi kot kalifornijski brancin, spada med Actinopterygii, Perciformes, Centralarchidae, Micropterus. Doma je v Kaliforniji v ZDA in ima prednosti, kot so hitra rast, odličen okus, bogata hranilna vrednost in visoka gospodarska vrednost. Postala je ena od pomembnih sladkovodnih ribogojnih vrst na Kitajskem. V zadnjih letih se je v ozadju preoblikovanja in nadgradnje ribištva ter močnega razvoja digitalnega in inteligentnega ribištva postopoma pojavilo industrializirano recirkulacijsko ribogojstvo. Način ribogojstva velikega brancina se prav tako premika od tradicionalne ribniške kulture k zelenemu in učinkovitemu krožečemu načinu ribogojstva. Recirkulacijsko ribogojstvo ima prednosti, kot so varčevanje z vodo in zemljo, visoka gostota naseljenosti in priročno upravljanje. S fizikalnimi, biološkimi, kemičnimi metodami in opremo se trdne suspendirane trdne snovi in škodljive snovi v vodnem telesu odstranijo ali pretvorijo v neškodljive snovi, tako da kakovost vode ustreza normalnim rastnim potrebam gojenih vrst, s čimer se uresniči recikliranje vode v razmerah visoke-gostote ribogojstva. Dosegel je dobre gospodarske koristi pri številnih gojenih vrstah.
Trenutno se raziskave recirkulacijskega ribogojstva velikega brancina osredotočajo predvsem na razmnoževanje, prehrano s krmo, izbiro seva, natančno hranjenje, spremembe vodnega okolja in kakovost prehrane. Raziskave industrijskega krožečega ribogojstva velikega brancina v zaprtih prostorih se v glavnem osredotočajo na gojenje nedoraslih-velikih rib, polno-ciklično gojenje odraslih rib pa ni bilo široko promovirano. Glavni izziv, s katerim se sooča krožeče ribogojstvo velikega brancina, je vzdrževanje dobrega vodnega okolja v pogojih visoke-gostote, da se zagotovi normalna rast gojenih vrst. Čiščenje vode je jedro recirkulacijskega ribogojstva, biofiltrski mediji za učinkovito čiščenje vode pa so temelj sistema za čiščenje vode. Čeprav obstaja veliko poročil o čiščenju vode z biofiltrirnimi mediji, manjkajo poročila posebej o industrializiranem recirkuliranem ribogojstvu velikega brancina, zlasti v zvezi s pregledovanjem učinkovitih biofiltrskih medijev za čiščenje vode, strukturo mikrobne skupnosti biofilmov na različnih biofiltrirnih medijih, učinkih zdravljenja in vplivih na rast gojenih vrst. Izbrani so bili trije tipi biofiltrskih medijev, med katerimi so kvadratna goba in biofiltrski medij s kroglo z zvrtinčeno plastjo nizki-stroški in enostavni za uporabo ter se pogosto uporabljajo pri čiščenju odpadne vode v ribogojstvu; Mutag Biochip 30 (skrajšano Biochip) je nova vrsta biofiltrskega medija, ki se je pojavil v zadnjih letih, s prednostmi odpornosti na udarce in dolge življenjske dobe, vendar učinki njegove praktične uporabe niso bili opisani. V ta namen je bila uporabljena tehnologija zaporedja z visoko{12}}prepustnostjo 16S rDNA za analizo položaja nastajanja biofilma treh biofiltrskih medijev za obdelavo vode, hkrati pa je bila analizirana situacija rasti velikega brancina, da bi izločili praktične biofiltrske medije za obdelavo vode in zagotovili učinkovit medij za obdelavo vode za industrializirano recirkulacijsko ribogojstvo velikega brancina.
1. Materiali in metode
1.1 Testni materiali
Biofiltrski mediji, izbrani za ta test, so bilikvadratna goba, Biočip, inkrogla z zvrtinčeno posteljo, kot je prikazano vSlika 1. Material kvadratne gobe je poliuretan, oblikovan kot kocka s stranico 2,0 cm, specifično površino (3,2~3,5)×10⁴ m²/m³. Material Biochip je polietilen, oblike kroga s premerom 3,0 cm, debeline približno 0,11 cm, specifične površine 5,5×10³ m²/m³. Material kroglice z zvrtinčeno plastjo je polietilen, efektivna specifična površina 500~800 m²/m³.
1.2 Eksperimentalno združevanje
Skupina za obdelavo medijev s kvadratnim gobastim biofiltrom je bila določena kot skupina T1, ustrezen medijski biofilm je bil označen z B1, ustrezna voda iz ribogojstva pa je bila označena z W1; skupina za obdelavo medijev z biofiltrom Biochip je bila določena kot skupina T2, ustrezen medijski biofilm je bil označen z B2, ustrezna voda iz ribogojstva pa je bila označena z W2; skupina za obdelavo medijev z biofiltrom z vrtinčeno posteljo je bila določena kot skupina T3, ustrezen medijski biofilm je bil označen z B3, ustrezna voda iz ribogojstva pa je bila označena z W3.
1.3 Sistem ribogojstva
Poskus je bil izveden v recirkulacijskem ribogojnem sistemu v Balidian Comprehensive Experimental Base Zhejiang Institute of Freshwater Fisheries.Skupaj je bilo 9 posod za gojenje, prostornina 500 L, efektivna prostornina vode 350 L. Biofiltrska posoda je bila izdelana iz plastičnega akvarija dolžine 80 cm, širine 50 cm in višine 50 cm, prostornine 200 L, efektivne prostornine vode 120 L.. Posoda za kulturo in posoda z biofiltrom sta bila povezana z vodno črpalko, da je nastala notranja cirkulacija, hitrost pretoka 3~4 L/min, z prezračevanjem za oksigenacijo, kisik, raztopljen v vodi, vzdrževan nad 5 mg/L. Biofiltrirni mediji so bili naključno razvrščeni v skupine, vsaka vrsta biofiltrirnih medijev je imela 3 ponovitve, vsak biofiltrski rezervoar je bil naložen z 2,0 kg biofiltrirnega medija, hkrati pa je bil suspendiran vir ogljika s počasnim{7}}sproščanjem. V obdobju gojenja biofilma je bilo dnevno zamenjanih 10 % vode.Začetni kazalniki kakovosti vode: Skupni dušik (TN) 9,41 mg/L, Skupni fosfor (TP) 1,02 mg/L, Amonijev dušik (TAN) 1,26 mg/L, Nitritni dušik (NO₂⁻-N) 0,04 mg/L, Permanganatni indeks (CODₘₙ) 3,73 mg/L.
1.4 Preizkusite upravljanje z ribami in kulturo
Kot gojena vrsta je bil uporabljen veliki brancin. Pred začetkom testa so bili 7 dni aklimatizirani v krožeči vodi.Test je potekal od 11. avgusta 2022 do 22. septembra 2022 in je trajal 42 dni.. Za razvrščanje v skupine je bil izbran veliki bas brez površinskih poškodb, zdrav in živahen, 60 rib je bilo naloženih v vsakem gojišču, hranjenih dvakrat na dan, časi hranjenja so bili ob 7:00 zjutraj in 16:00 popoldne, dnevna količina hranjenja je predstavljala približno 1,0 % ~ 1,5 % celotne telesne mase rib. Začetna telesna masa testne ribe je bila (20,46 ± 0,46) g.
1.5 Zbiranje vzorcev
Vzorce vode iz rezervoarja biofiltra smo zbirali vsaka 2 dni, pri čemer smo beležili kazalnike, kot so temperatura vode, raztopljeni kisik, pH vrednost in merili amonijev dušik in nitritni dušik. Zabeleženi so bili količina krmljenja, telesna masa rib na začetku in koncu poskusa ter stopnja preživetja. Po poskusu smo zbrali 1 L vode iz vsakega rezervoarja za kulturo z uporabo sterilnih vrečk za zbiranje vode, filtrirali skozi 0,22 µm filtrirno membrano in shranili v zamrzovalnik pri -80 stopinjah za kasnejšo uporabo. Vzorce medijev biofiltra po 0,5 g smo vzeli aseptično iz vsakega rezervoarja biofiltra, shranili v sterilizirano destilirano vodo, močno pretresli, da bi odstranili mikroorganizme s površine biofilma, nato filtrirali skozi 0,22 µm filtrirno membrano in shranili v zamrzovalnik pri -80 stopinjah za kasnejšo uporabo.
1.6 Merilne metode
1.6.1 Merjenje kakovosti vode
Temperaturo vode, raztopljeni kisik in pH vrednost smo zaznali z uporabo aPrenosni analizator kakovosti vode HACH Hq40d. Koncentracijo amonijevega dušika smo izmerili s spektrofotometrično metodo z Nesslerjevim reagentom. Koncentracijo nitritnega dušika smo določili s spektrofotometrično metodo s klorovodikovo kislino naftiletilendiamin.
1.6.2 Merjenje uspešnosti ribogojstva
Formule za izračun stopnje povečanja teže, razmerja pretvorbe krme in stopnje preživetja rib so naslednje.
l Stopnja povečanja telesne teže= (končna telesna masa ribe - začetna telesna masa ribe) / začetna telesna masa × 100 %;
l Razmerje pretvorbe krme= Poraba krme / Prirast teže;
l Stopnja preživetja= (Število rib na koncu poskusa / Začetno število rib na začetku poskusa) × 100 %.
1.6.3 Mikrobno visoko{1}}prepustno zaporedje
Bakterijska DNA je bila ekstrahirana iz vode in biofilma z uporabo kompleta za ekstrakcijo bakterijske DNA (OMEGA Biotech, ZDA). Specifična primerja 338F (5'–ACTCTACGGGAGGCAGCAG–3') in 806R (5'–GGACTACHVGGGTWTCTAAT–3') sta bila uporabljena za pomnoževanje regij V3 in V4 bakterijske 16S rDNA. PCR je uporabil reakcijski sistem TransGen AP221-02: 4 µL 5×FastPfu pufra, 2 µL 2,5 mmol/L dNTP, 0,4 µL FastPfu polimeraze, 0,8 µL vsakega od 5 µmol/L prednjih in povratnih primerjev, 0,2 µL BSA, 10 ng Predloga DNK, dopolnjena z ddH2O do 20 µL. Reakcijski pogoji PCR: 95 stopinj za 3 minute; 95 stopinj za 30 s, 53 stopinj za 45 s, 72 stopinj za 1 minuto, 28 ciklov; 72 stopinjsko podaljšanje za 10 minut. PCR pomnoževanje smo izvedli na PCR reakcijskem instrumentu 9700 (Applied Biosystems® GeneAmp®, ZDA). Produkte PCR smo očistili z uporabo kroglic in nato podvrgli sekvenciranju. Sekvenciranje je bilo naročeno podjetju Shanghai Majorbio BioPharm Technology Co., Ltd.
1.6.4 Analiza mikrobne raznovrstnosti
Neobdelani podatki, pridobljeni s sekvenciranjem, so bili najprej spojeni, čemur je sledilo filtriranje kakovosti branja in učinka spajanja ter korekcija smeri zaporedja, kar je privedlo do optimiziranih podatkov. Po normalizaciji končno dobljenih čistih podatkov sta bili OTU (Operational Taxonomic Units) analiza združevanja v skupine in taksonomska analiza izvedeni pri 97 % podobnosti. Histogrami vzorcev so bili narisani z uporabo Excela, toplotni zemljevidi pa so bili narisani s platformo Majorbio Cloud Platform.
1.7 Analiza podatkov
Za analizo pomembnosti razlik je bila uporabljena statistična programska oprema SPSS 16.0, za večkratne primerjave pa Duncanova metoda v analizi variance (ANOVA).
2. Rezultati in analiza
2.1 Čas nastajanja biofilma različnih biofiltrskih medijev
Kot je prikazano vSlika 2,v pogojih naravnega nastajanja biofilma je vsebnost amonijevega dušika v vodi rezervoarja biofiltra pokazala trend hitrega naraščanja, ki mu je sledil postopni upad.Vsebnost dušika v amoniakuv vodi rezervoarja biofiltra, ki ustreza kvadratni spužvi, je dosegel svoj vrh pri 17 dneh, pri 8,13 mg/L, nato pa se je postopoma znižal,doseže najnižjo vrednost pri 41 dneh, nato pa ostane okoli 0,20 mg/L, kar kaže na točas nastanka biofilma za kvadratno gobo je bil približno 17 dni. Spremembe vsebnosti amonijevega dušika v vodi rezervoarjev za biofiltre, ki ustrezajo Biochipu in krogli z zvrtinčeno plastjo, so bile v bistvu enake in kažejo nihajoče spremembe. Vrh dušika v amoniaku se je pojavil po 21 dneh, pri 7,88 mg/L oziroma 7,57 mg/L, kar kaže, dačas tvorbe biofilma za Biochip in biofilter z vrtinčeno posteljo je bil približno 21 dni. Vsebnost dušika v amoniakuv posodah za biofiltre, ki ustrezajota dva medija sta padla na najnižjo vrednost pri 43 oziroma 45 dneh.
2.2 Spremembe pH vrednosti vode v različnih posodah za kulture
OdSlika 3, je razvidno, da je bila začetna pH vrednost vode za kulturo 7,3. Ko se je čas kulture podaljšal, je pH-vrednost vode v vsaki posodi za kulturo pokazala trend padanja. Po 12 dneh je bila pH vrednost vseh posod za gojenje nižja od 6,0, kar je neugodno za rast gojene vrste.Zato je treba po 12 dneh tvorbe biofilma posvetiti pozornost prilagoditvi pH vrednosti vode v rezervoarju za kulturo..
2.3 Analiza sestave mikrobne skupnosti na biofilmih različnih biofiltrskih medijev in v vodi
2.3.1 Sestava mikrobne skupnosti na ravni vrste
Kot je prikazano vSlika 4,na ravni debla so bile prevladujoče bakterije na biofilmih treh biofiltrskih medijev enake, vse so bile Proteobacteria, Actinobacteriota, Bacteroidota in Chloroflexi. Njihova skupna relativna abundanca je bila 68,96 %, 64,74 % oziroma 65,45 %. Prevladujoče bakterije v ustrezni vodi za kulturo so bile drugačne. Prevladujoča bakterija v W1 je bila Actinobacteriota z relativno številčnostjo 64,66 %. Prevladujoče bakterije v W2 in W3 so bile Proteobacteria z relativno številčnostjo 34,93 % oziroma 50,10 %.
Slika. 4 Sestava bakterij v različnih biofilmih in vodi na ravni vrst
2.3.2 Sestava mikrobne skupnosti na ravni družine
Kot je prikazano vSlika 5, na biofilmih treh medijev je bilo približno 48 % bakterij bakterijskih skupnosti z relativno številčnostjo vseh manj kot 3 %. Prevladujoče bakterije B1 in B2 so bile enake, obe sta bili Xanthomonadaceae, z relativno številčnostjo 11,64 % oziroma 9,16 %; prevladujoča bakterija B3 je bila JG30-KF-CM45 z relativno številčnostjo 10,54 %. Prevladujoče bakterije v vodi za kulturo so bile drugačne od tistih na biofiltrskem mediju. Microbacteriaceae je bila absolutno prevladujoča bakterija v W1 z relativno številčnostjo 62,10 %; prevladujoče bakterije v W2 so poleg Microbacteriaceae (13,82%) vključevale tudi določen delež Rhizobiales (8,57%); prevladujoča bakterija v W3 je bila Rhizobiales z relativno številčnostjo 38,94 %, sledile so ji Flavobacteriaceae z relativno številčnostjo 15,89 %.
Preštetih je bilo 50 najboljših vrst na ravni rodu. Po obdelavi numeričnih vrednosti so bile spremembe številčnosti različnih vrst v vzorcih prikazane skozi barvni gradient barvnih blokov. Rezultati so prikazani vSlika 6. Leifsonia je bila prevladujoča bakterija v W1 z relativno številčnostjo 56,16 %; prevladujoči bakteriji v W2 sta bili Leifsonia (10,30 %) in Rhizobiales_Incertae_Sedis (8,47 %); prevladujoča bakterija v W3 je bila Rhizobiales_Incertae_Sedis z relativno številčnostjo 38,92 %. Med prepoznavnimi bakterijami na biofilmih je bil Thermomonas prevladujoč rod v B1 z relativno številčnostjo 4,71 %; prevladujoči rodovi v B2 in B3 so bili Nitrospira, z relativno številčnostjo 4,41 % oziroma 2,70 %.
Slika. 5 Sestava skupnosti bakterij v različnih biofilmihin vodo na ravni družine
Slika. 6 Toplotni zemljevid sestave bakterijske skupnosti v različnih biofilmih in vodi na ravni rodu
2.4 -Analiza raznolikosti mikrobnih skupnosti na biofilmih različnih biofiltrskih medijev in v vodi
Kot je prikazano vTabela 1, je bil Shannonov indeks mikrobnih združb na biofilmih različnih medijev večji kot pri ustrezni kulturni vodi, medtem ko je bil Simpsonov indeks ravno nasproten. Pri analizi ustrezne vode za kulturo je bil Shannonov indeks bakterijske skupnosti W2 najvišji, znatno višji kot pri W1 in W3, medtem ko je bil Simpsonov indeks bistveno nižji od indeksa W1 in W3, kar kaže, da je bila njena -raznolikost največja. Za razliko od -raznolikosti vode za kulturo, čeprav je bil Shannonov indeks bakterijske mikrobne skupnosti v gojiščih B2 največji in Simpsonov indeks najmanjši, med tremi biofiltrirnimi gojišči ni bilo pomembne razlike. Pokritost sekvenciranja vseh vzorcev je bila nad 0,990, kar kaže, da bi lahko globina sekvenciranja odražala pravo raven vzorcev.
2.5 Učinki različnih biofiltrirnih medijev na rast velikega basa
Tabela 2prikazuje razmere rasti velikega brancina v različnih skupinah biofiltrskih medijev. Po 44 dneh gojenja sta bili končna telesna masa in stopnja povečanja teže velikega brancina v skupini, ki je gojila kvadratne spužve, bistveno višji od tistih v skupinah z vrtinčeno posteljo in skupinah z biočipom, razmerje pretvorbe krme pa je bilo bistveno nižje kot v drugih skupinah. Stopnja preživetja velikega brancina v vsaki skupini je bila nad 97 %, brez pomembne razlike med skupinama.
3. Zaključek in razprava
3.1 Čas nastajanja biofilma različnih biofiltrskih medijev
Biofilmi se pritrdijo na površino biofiltrskega medija. Material, struktura in specifična površina biofiltrskega medija so glavni dejavniki, ki vplivajo na nastanek biofilma. Obstajata dve pogosti metodi za gojenje biofilma: metoda tvorbe naravnega biofilma in metoda tvorbe inokuliranega biofilma. Različne metode tvorbe biofilma vplivajo na čas zorenja biofilma. Hu Xiaobing et al. uporabili štiri različne metode za tvorbo biofilma, rezultati pa so pokazali, da je bil pri uporabi metod, kot so dodajanje hitozana, železovih ionov in inokulacija z izpraznjenim blatom za tvorbo biofilma, čas zorenja biofilma krajši kot pri metodi tvorbe naravnega biofilma. Čeprav lahko dodajanje koristnih mikroorganizmov ali aktivnih snovi skrajša čas nastajanja biofilma, obstajajo težave, kot so težave pri pridobivanju inokuluma, zapletena konstrukcija postopka in visoki stroški. Guan Min in drugi so v pogojih nizke vsebnosti organske snovi neposredno uporabili surovo vodo za tvorbo biofilma in rezervoar za biofilter je po približno 38 dneh uspešno zagnal naravno tvorbo biofilma. Ta rezultat raziskave je podoben rezultatom te študije. Rezultati te študije kažejo, da je bil pod enakimi pogoji tvorbe biofilma čas tvorbe biofilma kvadratne gobe krajši kot pri drugih dveh biofiltrskih medijih. To je lahko povezano z veliko specifično površino, močno hidrofilnostjo in enostavnostjo pritrditve biofilma kvadratne gobe. Specifična površina kvadratne gobe je kar 32.000 ~ 35.000 m²/m³, kar je veliko več kot pri drugih dveh medijih. Poleg tega je material kvadratne gobe poliuretan, ki se razširi, ko je izpostavljen vodi, ima visoko hidrofilnost in je ugoden za pritrditev in rast mikroorganizmov v vodi. Rezultati raziskav Li Yonga in sod. je tudi pokazalo, da sta bili zagon-zmogljivost in učinkovitost odstranjevanja dušika iz amoniaka poliuretanske gobe boljši kot pri polipropilenu, kar je skladno z rezultati te študije. Poleg tega je bila v tej študiji specifična površina biofiltrskega medija Biochip kar 5.500 m²/m³, kar je veliko več kot pri medijih s krogličnim biofiltrom z zvrtinčeno posteljo, vendar je bil čas tvorbe biofilma v bistvu enak kot pri medijih s kroglo z zvrtinčeno posteljo. To je lahko povezano z velikostjo por. Nekatere študije so poudarile, da notranja prostorska lestvica biofiltrskih medijev vpliva na rast biofilmov. Čeprav imajo nekateri biofiltrski mediji veliko specifično površino, so njihove pore v redu, velikost por pa je veliko manjša od debeline zrelega biofilma, kar lahko zlahka privede do blokade por, zaradi česar biofilm v porah težko doseže največjo kopičenje. Pore Biochipa so majhne, kar povzroči počasnejšo rast biofilma in daljši čas nastajanja biofilma.
3.2 Sestava mikrobne skupnosti biofiltrskega medija in vode za kulturo
V tej študiji so bile prevladujoče bakterije na biofiltrskem mediju in v ustrezni vodi za kulturo različne. Shannonov indeks biofilmov na biofiltrskem mediju je bil večji kot pri ustrezni kulturni vodi, kar kaže, da ima biofilterski medij učinek obogatitve mikroorganizmov. To je skladno z rezultati raziskave Hu Gaoyu et al. Obstaja veliko dejavnikov, ki vplivajo na strukturo mikrobne skupnosti, kot so vrsta nosilca, globina filtra, slanost, koncentracija organske snovi itd. Isti biofiltrski medij pod različnimi pogoji gojenja bo imel različne mikrobne skupnosti na biofilmu. Avtor je nekoč proučeval položaj nastajanja biofilma v medijih za biofiltre z zvrtinčeno plastjo krogle v recirkulacijskem ribogojnem sistemu za orjaško sladkovodno kozico (Macrobrachium rosenbergii). Rezultati so pokazali, da je bila prevladujoča vrsta na njegovem biofilmu Firmicutes, medtem ko je bila v tej študiji prevladujoča vrsta na biofilmu kroglice z zvrtinčeno posteljo Proteobacteria. Glavni razlog za to razliko so lahko različna ribogojna okolja. Trije biofiltrski mediji, uporabljeni v tej študiji, so imeli enake začetne pogoje za gojenje biofilmov. Možno je, da sta bila zaradi različnih fizikalnih lastnosti medijev različna tudi debelina oblikovanega biofilma in notranje okolje, kar je povzročilo razlike v mikrobnih združbah. Zato je razlika v nosilcih glavni razlog za razlike v mikrobnih združbah. Poleg tega med procesom ribogojstva vodno okolje in mikrobna skupnost vplivata drug na drugega. Razlogi za razlike v mikrobnih združbah so lahko povezani z okoljskimi dejavniki. Na primer, raziskava Yuana Cuilina je pokazala, da skupno število heterotrofnih bakterij v telesu; Fan Tingyu idr. verjeli, da lahko vrednost pH pomembno vpliva na skupno vsebnost dušika v vodi in igra ključno vlogo pri porazdelitvi vodnih bakterijskih skupnosti v celinskih rečnih odsekih. Amonijakov dušik, skupni fosfor in klorofil a v različni meri vplivajo tudi na sestavo bakterijskih združb v vodnem telesu. Okoljski dejavniki, ki povzročajo razlike v sestavi mikrobne skupnosti v tej študiji, še vedno potrebujejo dodatno potrditev.
3.3 Učinki različnih biofiltrirnih medijev na rast velikega basa
Glede na rezultate rasti je brancin v skupini s kvadratnimi gobami rasel najhitreje, s stopnjo povečanja teže, ki je bila znatno višja kot pri drugih dveh medijih, in najnižjim razmerjem pretvorbe krme. To je skladno s prejšnjimi rezultati raziskav. V tej študiji sta nastajanje biofilma in ribogojstvo potekala hkrati. Glede na čas nastajanja biofilma je biofilm kvadratne gobe dozorel prej, po dozorevanju biofilma pa sta bili koncentraciji amonijevega dušika in nitritnega dušika v vodi vedno nižji kot pri drugih dveh medijih. Poleg tega ima kvadratna goba določeno filtrirno zmogljivost, vsebnost trdnih suspendiranih trdnih snovi v vodi za kulturo je bila nižja in voda je bila relativno bistra. Boljša rast velikega brancina v skupini kvadratnih spužev je lahko povezana z dobro kakovostjo vode. Vendar je treba učinke čiščenja medija s kvadratno gobo na skupni dušik, skupni fosfor in permanganatni indeks v vodi dodatno preučiti. Omeniti velja, da je med poskusom vrednost pH pokazala splošni trend padanja. Po 12 dneh gojenja je bila pH vrednost vseh posod za kulturo nižja od 6,0, kar je v skladu z rezultati raziskav Zhang Longa et al. Znižanje vrednosti pH je posledica dejstva, da med procesom gojenja biofilma nastane veliko število vodikovih ionov, kar povzroči znižanje pH vrednosti vode. Zato je treba med procesom tvorbe biofilma nemudoma prilagoditi pH-vrednost vode v rezervoarju za kulturo, da zagotovimo, da je v normalnem območju rasti gojene vrste. Če upoštevamo ekonomske stroške, je tržna cena kvadratne gobe 70 ~ 100 RMB/kg, njena cena pa je med drugima dvema medijema za biofiltre. V kombinaciji z rezultati rasti je kratkoročno kvadratna goba razmeroma praktičen biofiltrski medij za čiščenje vode za recirkulacijsko ribogojstvo. Vendar ima kvadratna goba slabo žilavost in kratko življenjsko dobo. Učinke dolgoročne-uporabe in učinke na ribogojstvo je treba dodatno preveriti.
Če povzamemo,v pogojih naravnega nastajanja biofilma ima kvadratni gobasti biofilterski medij najkrajši čas nastajanja biofilma, zmerno ceno, končna telesna masa in stopnja povečanja teže velikega brancina v skupini s kvadratastimi gobastimi gobami pa sta bili bistveno višji kot pri drugih dveh biofilterskih medijih. Kratkoročno gledano je relativno praktičen biofiltrski medij za čiščenje vode za recirkulacijsko ribogojstvo.